开发活细胞DNA成像新工具——CRISPRdelight
更新时间:2024-07-09 11:39:15
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CRISPRdelight是一种创新性的活细胞DNA成像工具,这一工具基于CRISPR-Cas12a系统,通过优化和筛选,实现了对非重复序列DNA在活细胞中的高效成像。
CRISPRdelight系统克服了传统CRISPR系统在非重复DNA成像方面的限制,通过引入hyperdLbCas12a突变体,显著提高了标记效率和信号质量。研究团队还筛选出了能够表达长达50次crRNA重复序列的CAG启动子,构建了更为简洁且高效的DNA成像系统。
利用CRISPRdelight系统,研究团队成功实现了对多种非重复序列基因位点的活细胞标记,包括CCAT1基因位点等。该系统不仅在多种细胞系中表现出色,还揭示了基因位点在细胞核内的定位与其运动能力和转录活性的相关性。例如,位于细胞核膜处Lamin蛋白层的CCAT1位点运动能力较弱,转录活性也较低;而在应激条件下,HSP基因位点会向核斑重新定位,以提高转录活性。
CRISPRdelight系统还结合了RNA适配体技术,实现了对多种卫星DNA的活细胞多色成像。这一创新使得研究人员能够同时观察多个基因组位点的空间位置和动态变化,为研究基因表达调控机制提供了更为强大的工具。
CRISPRdelight系统的开发为活细胞DNA成像领域带来了革命性的进展,为研究基因组动态和调控提供了更简单、更便利的新手段。这一成果不仅丰富了CRISPR-Cas系统的应用范畴,也为生命科学研究的深入发展提供了新的可能。
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